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DNA提取实验步骤(磁珠法)

发表时间:2023-09-19

DNA提取实验步骤(磁珠法)

核酸是在生物界中异常重要的生物大分子。其在生物活动中扮演着最为重要的角色,繁衍、发育、保持形态、衰败于死亡等一切生物活动中都有其的参与。在新世纪,核酸是所有生命科学学科的热门研究课题,其生物化学,遗产学等生物学科的基础,其广度与深度是绝大多数学科都难以望其项背的。

要进行核酸研究,就需先将核酸从繁杂的生物大分子中提取出来,再将提取出的核酸去杂纯化,达到一定纯度后,方可用于科研或实际应用。

现在,我将给大家分享一下DNA提取实验步骤(磁珠法),为看到文章的大家提供科研与实际应用上的帮助。

DNA提取磁珠法是一种很常见的分子生物学技术,它利用磁性珠子来分离和纯化DNA分子。其原理可以概括为以下几个步骤:

一、细胞破碎

首先,需要将细胞或组织样本破碎,以释放DNA。这可以通过机械方法(如机械破碎或超声波破碎),化学方法(碱性溶液)或酶作用(加入蛋白酶或溶菌酶)来实现细胞破裂,将DNA释放。

二、结合磁珠

将具有磁性的微小珠子(表面带负电)添加到样品中,而磁珠buffer是带正电荷的盐离子,样本被其影响,磷酸基团带有负电荷,磁珠从而与DNA结合。

三、分离洗涤

DNA含有高能磷酸骨架,因此其亲水性比蛋白质,脂肪,多肽等大分子生物物质强。可根据这一理化性质,用层析,梯度离心法等方法将其分离纯化。也可根据其他理化性质的差异将DNA与其他生物大分子分离。在实验室中,无水乙醇沉淀法是最常见的分离DNA的方法。乙醇不与核酸发生化学反应,还能与水相混相融,是最理想的沉淀剂。乙醇能够与DNA周围的水分子结合,使得DNA失水从而聚合。为去除可能残存在DNA分子上的杂质,会多次洗涤磁珠和DNA,以确保DNA纯度。

四、释放DNA

最后,通过改变条件(通常是改变温度或加水、EB来破坏高盐环境形成低盐环境)来解除DNA与磁珠的结合,从而将纯化的DNA从磁珠上释放出来。

以上过程即是DNA提取实验步骤(磁珠法,希望能给大家带来帮助。现北京百奥创新科技有限公司提供Zymo DNA提取(磁珠法)试剂盒,欢迎咨询采购!