DNA提取原理(磁珠法)
发表时间:2023-09-19DNA(脱氧核糖核苷酸)在生物学和遗传学中具有极其重要的地位。DNA是存储生物体遗传信息的载体,它决定了生物遗传特征和功能的遗传代码,DNA在医学、生物工程和基因编辑、科学研究等都有极为重要的作用。总的来说,DNA是生命科学的核心分子,对于了解生命的本质,是不可绕过的重要一节。它被认为是生命的基础,对人和自然界都有深远的影响。因此,DNA提取是生物技术中的重要一环。以下便是DNA提取原理(磁珠法)的具体内容。
DNA提取原理(磁珠法)的最主要因素是磁性珠子(磁珠)上表面的基团与DNA磷酸基团、盐溶液中金属离子所形成的相互作用。
磁珠的表面通常被修饰或涂覆上一层特殊的分子,例如硅胶或其他具有亲和性的分子或基团(DNA/RNA提取多为羧基)。这些分子能够与DNA相互吸引和结合,因为DNA分子上带有带电的磷酸基团,而修饰的磁珠表面带有相应的亲和性分子。
DNA提取(磁珠法)中多用聚乙二醇(PEG)。低浓度的PEG作为聚合剂,还能保持溶液的沾度,使磁珠可以保持悬浮状态,不易聚沉,也不易造成非特异性吸附。
DNA提取原理(磁珠法)最关键的因素即为在PEG和NaCl的促进作用下,因DNA构陷变化,从而使得磷酸骨架上的带负电的磷酸基团与磁珠表面的羧基结合,磷酸基团(负电荷)借助着盐溶液中的的Na+离子与磁珠上羧基(负电荷)所形成的“阴离子-阳离子-阴离子”盐桥,使DNA被特异性吸附到磁珠表面。
当缓冲液被弃除后,加入水性分子,DNA分子会被快速水化,盐桥中三者间的离子相互作用被解除,使得被吸附到磁珠上的DNA分子被纯化出来。
应用外部磁场可以方便地控制磁珠的位置。通过将样本混合磁珠后,应用磁场使磁珠集中在一个区域,而未结合的杂质则可以轻松去除,从而实现DNA的分离和洗脱。
总之,DNA提取原理(磁珠法)就是利用磁性珠子表面的特殊化学性质,与DNA之间的亲和性相互作用,以及外部磁场的帮助,能够高效地提取和分离DNA,使得DNA提取(磁珠法)成为一种广泛应用于分子生物学实验和临床诊断的有效技术。
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