血清必须要热灭活吗?
发表时间:2022-10-12血清是生长和附着因子、矿物质、脂质和激素的来源,是细胞培养的重要组分。血清能调节细胞膜的通透性,同时能作为载体携带酶、脂质、酶和微量元素等进入细胞。在使用的过程中,到底是选择没有灭活的血清?还是选择热灭活血清?有啥区别吗?
热灭活可以破坏血清中补体的活性。哺乳动物血清中存在的补体蛋白参与细胞的溶解,收缩平滑肌,刺激细胞和血小板释放组胺,并激活淋巴细胞和巨噬细胞。有研究比较了正常热灭活胎牛血清对各种细胞株的生长能力影响(如下图所示),发现11株细胞中,热灭活对6株细胞有负面影响(红框)、3株无影响(绿框)、2株有微弱正面改善(黄框),因此在多数细胞培养中血清不需要热灭活,热灭活对细胞生长没有明显的促进作用,反而还会影响血清质量,使细胞的生长速率降低。因此如果不是非必须,可不必做血清热灭活这一处理。所以一般的细胞选择没有灭活的血清即可。
图1 使用未灭活或灭活血清的细胞生长状况
但是有些细胞需要选择热灭活血清,如胚胎干细胞(ESC)、平滑肌细胞、免疫细胞和昆虫细胞培养。
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